紅細(xì)胞裂解液

紅細(xì)胞裂解液

紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞zui簡(jiǎn)便易行的方法，即用裂解液裂解紅細(xì)胞，它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞（僅限于哺乳動(dòng)物外周血）。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化，淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。經(jīng)裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞，可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。

保存條件：2-8℃保存。

主要成分：NH₄Cl，NaHCO₃和EDTA。

本產(chǎn)品經(jīng)無(wú)菌過(guò)濾。

使用說(shuō)明

從全血中得到白細(xì)胞：

1，冰箱預(yù)冷，新鮮抗凝血或者凍存抗凝血，按1:3-5的比例向細(xì)胞沉淀中加入混勻。
2，800-1000rpm離心3-5分鐘，離心棄去上層紅色液體。
3，收集沉淀部分，再加入原血等體積的，用去尖吸頭輕輕吹打起來(lái)。
4，800-1000rpm離心3-5分鐘，離心棄去上清。
5，如果沉淀還有紅色，可重復(fù)步驟2和3。
6，加入Hank’s液或無(wú)血清培養(yǎng)液離心洗2-3次。
7，重懸細(xì)胞，用于培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。如想提取RNA，只裂解一次，立刻進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)。而想提取DNA，可以裂解兩三次。直接進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)。

組織細(xì)胞樣品：
1.新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個(gè)細(xì)胞懸液，離心棄去上清液。
2.從4℃冰箱中取出ELS裂解液，按1:3-5的比例向細(xì)胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml細(xì)胞壓積加入3-5ml裂解液），輕輕吹打混勻。
3.800-1000rpm離心5-8分鐘，離心棄去上層紅色清液。
4.收集沉淀部分，加入Hank’s液或無(wú)血清培養(yǎng)液離心洗2-3次。
5.如裂解不*可重復(fù)步驟2和3。
6.重懸細(xì)胞，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如提取RNA，是于步驟4開(kāi)始使用DEPC水配制的溶液中進(jìn)行。

注意事項(xiàng)

1.本產(chǎn)品經(jīng)無(wú)菌處理，請(qǐng)?jiān)跐崈襞_(tái)內(nèi)進(jìn)行操作。
2.為獲得*的裂解效果，加入裂解液混勻后可置冰浴中放置3-5分鐘。
3.裂解的所有步驟都可在冰上或4℃進(jìn)行。
4.為了您的健康和安全，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。